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[1]张荟蓉,周志义,耿安利*.柄蓝状菌原生质体的制备与再生条件优化[J].武汉工程大学学报,2018,40(06):601-605.[doi:10. 3969/j. issn. 1674?2869. 2018. 06. 003]
　ZHANG Huirong,ZHOU Zhiyi,GENG Anli*.Optimized Conditions for Preparation and Regeneration of Protoplasts from Talaromyces Stipitatus[J].Journal of Wuhan Institute of Technology,2018,40(06):601-605.[doi:10. 3969/j. issn. 1674?2869. 2018. 06. 003]
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柄蓝状菌原生质体的制备与再生条件优化(/HTML)
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《武汉工程大学学报》[ISSN:1674-2869/CN:42-1779/TQ]

卷:
40
期数:
2018年06期
页码:
601-605
栏目:
化学与化学工程
出版日期:
2018-12-28

文章信息/Info

Title:
Optimized Conditions for Preparation and Regeneration of Protoplasts from Talaromyces Stipitatus
文章编号:
20180603
作者:
张荟蓉1; 周志义2; 耿安利*3
1. 武汉工程大学化学与环境工程学院，湖北 武汉 430205；2. 武汉工程大学化工与制药工程学院，湖北 武汉 430205；3. 新加坡义安理工学院，新加坡 999002
Author(s):
ZHANG Huirong1;  ZHOU Zhiyi2;  GENG Anli*3
1. School of Chemical and Environmental Engineering， Wuhan Institute of Technology， Wuhan 430205， China；2. School of Chemical and Pharmaceutical Engineering， Wuhan Institute of Technology， Wuhan 430205， China；3. Ngee Ann Polytechnic， Singapore 999002
关键词:
柄蓝状菌; PEG/CaCl2转化; 原生质体; 再生条件
Keywords:
Talaromyces Stipitatus;  PEG/CaCl2 transformation;  protoplasts;  regeneration
分类号:
Q939.9
DOI:
10. 3969/j. issn. 1674?2869. 2018. 06. 003
文献标志码:
A
摘要:
为了建立以聚乙二醇/氯化钙（PEG/CaCl2）原生质体介导的柄蓝状菌（Talaromyces Stipitatus）高效的遗传转化系统，分别从材料选择，真菌菌龄，不同的渗透压稳定剂，酶的不同种类配比，酶的浓度，酶解时间及不同再生方式对柄蓝状菌EMM原生质的制备与再生条件进行优化。结果表明：以柄蓝状菌EMM 接种生长48 h的菌丝为制备材料，1 mol/L MgSO4作为渗透压稳定剂，菌丝在温度为30 ℃，浓度为50 mg/mL的裂解酶溶液中酶解3 h，得到的原生质体先用再生培养基孵化培养12 h，然后再与PDA培养基混合铺板，以上组合条件下原生质体的释放量可达8.73×108 /mL，再生率可达17.7％。
Abstract:
To establish a high efficient genetic transformation system mediated by the polyethylene glycol/calcium chloride （PEG/CaCl2） protoplast for Talaromyces Stipitatus （T. Stipitatus）， the preparation and regeneration conditions of EMM protoplasts from T. Stipitatus were optimized such as materials， fungal age， different osmotic pressure stabilizers， different enzyme type ratios， enzyme concentration， enzymolysis time and the regeneration mode. The results show that when the protoplasts are prepared with age of 48 h mycelia from T. Stipitatus EMM as preparation materials， 1 mol/L MgSO4 as the osmotic stabilizer in mass concentration of 50 mg/mL lyase digested for 3 h at 30 ℃， the protoplasts are cultured in the regeneration medium for 12 h and finally plated with PDA medium， the release amount of protoplasts is 8.73×108/mL with 17.7% of the regeneration rate.

参考文献/References:

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相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2017-06-04基金项目：新加坡国立研究基金会项目（NRF20100TH-TRD001-003）作者简介：张荟蓉，硕士研究生。E-mail： [email protected]*通讯作者：耿安利，博士，教授。E-mail： [email protected]引文格式：张荟蓉，周志义，耿安利. 柄蓝状菌原生质体的制备与再生条件优化［J］. 武汉工程大学学报，2018，40（6）：601-605.
更新日期/Last Update: 2018-12-22