DBO类β-内酰胺酶抑制剂关键中间体（2S，5R）-6-苄氧基-7-氧代-1，6-二氮杂双环［3.2.1］辛烷-2-羧酸（Ⅰ）可由（2S，5R）-6-苄氧基-7-氧代-1，6-二氮杂双环［3.2.1］辛烷-2-羧酸苄酯（Ⅱ）水解得到，但是收率只有68%，而且需要在低温下（-20~

-15 ℃）反应4.5 h，反应条件比较苛刻，反应时间则更长［7］。

近年来，连续流微通道反应器在化学药物合成领域受到越来越多的关注，其设备尺寸小，物料扩散距离短，质量和热量可实现快速传递和精准控制，反应体积微型化，持液量小使过程本质安全［8］。与常规釜式反应相比，微通道反应器具有传热传质性能好、效率高、连续化操作方便、安全性高等特点［9-15］。

基于此，本文以（2S，5R）-6-苄氧基-7-氧代-1，6-二氮杂双环［3.2.1］辛烷-2-羧酸苄酯（Ⅱ）为原料，在微通道反应器内与氢氧化锂的丙酮水溶液反应，水解制备DBO类新型β-内酰胺酶抑制剂关键中间体（2S，5R）-6-苄氧基-7-氧代-1，6-二氮杂双环［3.2.1］辛烷-2-羧酸（Ⅰ），考察了反应溶剂、温度、停留时间和碱对反应的影响，优化了工艺条件，提高了反应速率和收率，可实现工业化生产。其合成路线如图2所示。

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图2 关键中间体（Ⅰ）的合成

Fig. 2 Synthesis of key intermediate （Ⅰ）

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

试剂：（2S，5R）-6-苄氧基-7-氧代-1，6-二氮杂双环［3.2.1］辛烷-2-羧酸苄酯，实验室自制；氢氧化锂（萨恩化学技术上海有限公司）；丙酮（西陇科学股份有限公司）；盐酸（国药集团化学试剂有限公司）；二氯甲烷（武汉格奥化学技术有限公司）。

仪器：PR224ZH型电子天平；RCH-1000带加热板磁力搅拌器；N-12108旋转蒸发仪；Chemtrix? Labrtix启动流动反应器；带Luer连接的5 000 μL玻璃气密注射器（由一个玻璃筒和一个带PTFE柱塞密封的金属柱塞组成）；氟化乙烯-丙烯盘管（内径0.8 mm）。

1.2 实验方法

1.2.1 微通道技术合成 自建流动反应装置由1台Fusion 1 000型注射泵输送试剂/溶剂、2个带Luer连接的5 000 μL玻璃气密注射器，及1台10.0 mL氟化乙烯丙烯盘管反应器（其内径为0.8 mm）组成（图3）。注器泵A用于引入化合物（Ⅱ）（1.0 mol/L 1.831 g， 5.0 mmol）的丙酮溶液，流速250 μL/min，注射器泵B用于引入LiOH（1.1 mol/L， 0.132 g， 5.5 mmol）的水溶液，流速250 μL/min。两种溶液在室温下通过T型混合器混合，然后进入线圈反应器（10.0 mL，内体积）45 ℃反应。盘管末端出口接收目标产物混合液，完毕后减压蒸馏除去溶液中的丙酮，以甲苯洗涤3次，收集水相，水相以1 mol/L盐酸溶液调节体系pH值至3，然后以二氯甲烷萃取3次，收集有机相，有机相以无水硫酸钠进行干燥。减压蒸馏除去二氯甲烷，得到淡黄色油状物质，纯化得1.312 g物质（Ⅰ），收率95%。

1.2.2 常规反应合成 称取化合物（Ⅱ）（1.831 g， 5.0 mmol）置于50 mL圆底烧瓶中，加入5 mL丙酮搅拌至澄清，将LiOH（0.132 g，5.5 mmol）溶于5 mL水中，室温条件下缓慢滴加到反应体系中，滴加完毕，升温至45 ℃反应20 min，完毕后减压蒸馏除去溶液中的丙酮，以甲苯洗涤3次，收集水相，水相以1 mol/L盐酸溶液调节体系pH值至3，然后以二氯甲烷萃取3次，收集有机相，有机相以无水硫酸钠进行干燥。减压蒸馏除去二氯甲烷，得到淡黄色油状物质，纯化得0.583 g物质（Ⅰ），收率39%。

2 结果与讨论

2.1 影响目标产物（Ⅰ）的因素

2.1.1 溶剂对反应的影响 固定碱为氢氧化锂，流速为250 μL/min，温度为25 ℃，考察溶剂对目标化合物收率的影响，结果如表1所示。当反应溶剂选择甲醇、乙腈、四氢呋喃时，无法得到较高的产率；反应溶剂为丙酮时，收率明显提高。这是由于碱催化的酯水解以酰氧键断裂的方式进行，该反应机理是与双分子亲核取代（SN2）机理相似，OH-进攻羰基碳原子，在形成新的C-O的同时，酰氧键断裂，苄氧基以负离子的形式离去，极性小、非质子溶剂有利于SN2反应进行，乙腈、甲醇、丙酮、四氢呋喃极性依次减小，丙酮、四氢呋喃虽都属于非质子性溶剂，但化合物（Ⅱ）在四氢呋喃的溶解度不高，因此选择丙酮为溶剂。

2.1.2 温度对反应的影响 固定碱为氢氧化锂，流速为250 μL/min，溶剂为丙酮，考察温度对目标化合物收率的影响，结果如表2所示。随着反应温度的升高，目标化合物的收率先升高后降低，当反应温度为45 ℃时，目标化合物收率最高，达到95%，与传统的釜式反应低温条件有很明显差异。这是由于该反应是放热反应，传统釜式反应物料大，而连续流微反应器是微米级管道，持液量小，体系放热往往对反应影响不大，反而稍微加热可提高反应速率，因此，确定反应温度为45 ℃。

2.1.3 停留时间对反应的影响 固定碱为氢氧化锂，溶剂为丙酮，温度为45 ℃，考察流速（即停留时间）对目标化合物收率的影响，结果如表3所示。反应流速增大，停留时间减少，目标化合物收率先升高后降低，这是因为，流速慢停留时间长，反应时间增加，脲环被破坏，副产物增多；流速快停留时间短，化合物（Ⅱ）与氢氧化锂的接触时间较短，反应不充分。当流速为250 μL/min （停留时间为20 min）时，在较大流速以及较短的停留时间内反应收率达到最高，所以最佳流速为250 μL/min，停留时间为20 min。

2.1.4 碱对反应的影响 固定流速为250 μL/min，溶剂为丙酮，温度为45 ℃，考察碱对目标化合物收率的影响，结果如表4所示。以氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠作碱时，目标化合物收率都只有中等收率，以氢氧化锂作碱时，目标化合物收率明显增高。这是由于碱性的强弱对脲环的结构有显著的影响，碱性太强环脲结构易开环，太弱酯水解反应不完全，因此选择氢氧化锂作碱。

2.2 化合物（Ⅰ）的结构表征

目标化合物（Ⅰ）的核磁共振氢谱、碳谱、高分辨质谱数据如下：1H NMR （400 MHz， DMSO-d6） δ 7.48~7.39 （m， 2H）， 7.42~7.28 （m， 3H）， 4.93 （d， J = 11.4 Hz， 1H）， 4.88 （d， J = 11.4 Hz， 1H）， 3.53 （s， 1H）， 3.40 （d， J = 7.2 Hz， 1H）， 3.19 （d， J = 11.5 Hz， 1H）， 2.77 （dt， J = 11.7， 3.3 Hz， 1H）， 2.10 （dd， J = 13.8， 6.3 Hz， 1H）， 1.85~ 1.64 （m， 2H）， 1.58 （td， J = 11.9， 6.3 Hz， 1H）； 13C NMR （100 MHz， DMSO-d6） δ 173.12， 170.17， 136.74， 129.30，128.78，128.75，77.22，62.98，58.32， 47.54， 40.64，40.43， 40.23，40.02，39.81，39.60， 39.39，22.20，21.64； HRMS （ESI）， m/z： 299.100 6 ［M+Na］+。综上，确定该化合物为目标化合物。

3 结 论

应用连续流微反应技术，对DBO类新型β-内酰胺酶抑制剂的关键中间体（2S，5R）-6-苄氧基-7-氧代-1，6-二氮杂双环［3.2.1］辛烷-2-羧酸（Ⅰ）的合成进行了优化。在微通道反应器中，以（2S，5R）-6-苄氧基-7-氧代-1，6-二氮杂双环［3.2.1］辛烷-2-羧酸苄酯（Ⅱ）为原料，与氢氧化锂的丙酮水溶液反应，经停留时间20 min，温度为45 ℃，水解制备DBO类新型β-内酰胺酶抑制剂关键中间体（2S，5R）-6-苄氧基-7-氧代-1，6-二氮杂双环［3.2.1］辛烷-2-羧酸（Ⅰ），收率达95%。与传统釜式反应相比，该工艺在提高收率的同时大幅度缩短了反应时间，具有良好的工业化应用前景。